خانه / پایان نامه / پزشکی / بررسی متابولیسم داروی نوسکاپین در سلولهای مجزای کبد موش

بررسی متابولیسم داروی نوسکاپین در سلولهای مجزای کبد موش

  • خرید و دانلود با لینک مستقیم
    • فرمت فایل : ورد doc
    • تعداد صفحه : 82
    • قیمت : 4900 تومان
    • کد فایل : 69006

    پایان نامه جهت دریافت درجه دکتری داروسازی

    شرح مختصر :  اطلاع از مسیرهای متابولیسم دارو نقش مهمی در درک سمیت دارو دارد. این اطلاعات می توانند در طراحی داروهای جدید و روشن کردن مکانیسم سرطان زایی ترکیبات شیمیایی به کار روند. از
    این رو یافتن روشی مناسب برای بررسی متابولیسم داروها گام مهمی در جهت رسیدن به دیگر اطلاعات  با ارزش در مورد داروها است.

    متابولیسم نوسکاپین در ادرار انسان، خرگوش و موش صحرایی بررسی شده است. طبق نتایج به دست آمده از این مطالعات نوسکاپین از دو مسیر o- دمتيلاسیون و شکسته شدن پیوند C1-9 متابولیزه می شود و مکونین به عنوان محصول عمده متابولیسم آن شناخته شده است.

    در این تحقیق متابولیسم نوسکاپین توسط یک روش ex vivo، سلولهای جدا شده کبدی، مورد بررسی قرار گرفت این روش از چند جنبه دارای اهمیت است: اين روش حد واسط مناسبی بین روشهای قبلی مانند آنزیم های حل شده، فراکسیون ارگان جدا شده و مطالعه مستقیم روی حیوان کامل است.

    این سلولها خصوصیات لازم بافت دست نخورده مانند نفوذپذیری غشا را دارا هستند از این رو در بسیاری از مطالعات بیوشیمیایی به کار می روند.

    در این تحقیق سلولهای کبد موش صحرایی طی یک فرآیند دقیق جدا شدند و زنده بودن آنها با آزمایش منع تریپان آبی %۱/۰ و مشاهده میکروسکوپی سلولها تأیید شد. شناسایی استاندارد داروی نوسکاپین و متابولیت اصلی آن، مکونین توسط روش HPLC صورت گرفت. اگر چه استانداردهای نوسکاپین و متابولیت اصلی آن در محلولهای Spike شده مشاهده شدند اما این روش قادر به شناسایی متابولیت ها در عصاره سلولی نبود.

    به نظر می رسد که افزایش حساسیت روش به مشاهده همزمان نوسکاپین و متابولیت ها کمک کند.

    فهرست مطالب

    چکیده پایان نامه

    بخش اول: مقدمه

    مقدمه

    ۱-۱- اوپیوییدها

    ۱-۱-۱- تاریخچه

    ۱-۱-۲- آلکالوییدهای تریاک

    ۱-۱-۳- پپتیدهای اوپیویید درون زاد

    ۱-۱-۴- آثار اوپیوییدها بر اعضاي مختلف

    ۱-۱-۵- مصارف باليني اوپیوییدها

    ۱-۲- متابولیسم

    ۱-۲-۱- تاریخچه

    ۱-۲-۲- کلیات متابولیسم

    ۱-۲-۳- مکان های متابولیسم داروها

    ۱-۲-۴- عوامل تعیین کننده سرعت تغییر شکل زیستی………………………………………..

    ۱-۲-۵- تکنیک های تجربی بررسی متابولیسم…………………………………………………..

    ۱-۲-۶- کاربرد و اهمیت بررسی متابولیسم………………………………………………………

    ۱-۳- جداسازی سلولهای کبد

    ۱-۴- روش های مطالعه شده برای شناسایی و اندازه گیری نوسکاپین و متابولیت هایش.

    ۱-۵- کلیاتی درباره کروماتوگرافی و HPLC…………………………………………………….

    ۱-۵-۱- تاریخچه

    ۱-۵-۲- اساس کروماتوگرافی……………………………………………………………………….

    ۱-۵-۳- فازهای متحرک و ساکن در کروماتوگرافی مایع……………………………………..

    ۱-۵-۴- کروماتوگرافی مایع با کارآیی بالا………………………………………………………..

    ۱-۵-۵- اساس دستگاه HPLC……………………………………………………………………..
    ۱-۶- نوسکاپین………………………………………………………………………………………….

    ۱-۶-۱- برخی اثرات نوسکاپین…………………………………………………………………….

    ۱-۶-۲- فارماكوكينتيك نوسكاپين…………………………………………………………………..

    ۱-۶-۳- مروری بر روند متابولیسم نوسکاپین…………………………………………………….

    بخش دوم: روشها و مواد

    ۲-۱- اهداف مطالعه…………………………………………………………………………………….

    ۲-۲- دستگاه ها و وسایل ……………………………………………………………………………

    ۲-۳- مواد………………………………………………………………………………………………..

    ۲-۴- تهیه بافرهای پرفیوژن…………………………………………………………………………..

    ۲-۴-۱- محلول Stock بافر هنکس با غلظت ۱۰ برابر………………………………………..

    ۲-۴-۲- محلول Stock بافر کربس- هنزلیت با غلظت ۲ برابر………………………………

    ۲-۴-۳- بافر هنکس یک……………………………………………………………………………..

    ۲-۴-۴- بافر هنکس دو……………………………………………………………………………….

    ۲-۴-۵- بافر کربس آلبومین………………………………………………………………………….

    ۲-۴-۶- بافر کربس- هپس…………………………………………………………………………..

    ۲-۵- تهیه محلول کلاژن و کوت کردن پلیت ۶خانه……………………………………………

    ۲-۶- محیط کشت……………………………………………………………………………………..

    ۲-۶-۱- مراحل تهیه محیط کشت: (۱:۱) DMEM, F12……………………………………….

    ۲-۷- سرم جنین گاو (FBS)…………………………………………………………………………

    ۲-۸- کیت استریل پرفیوژن…………………………………………………………………………..

    ۲-۹- تهیه هپاتوسیت های تازه………………………………………………………………………

    ۲-۹-۱- نگهداری سلولهای به دست آمده از کبد موش………………………………………..

    ۲-۹-۲- بررسی حیات سلولی و نحوه اثر دادن دارو روی سلولهای جدا شده از کبد موش………..

    ۲-۹-۳- تهیه نمونه برای انجام آنالیز……………………………………………………………….

    ۲-۱۰- روش سنتز مکونین (۶ و ۷- دی متوکسی فتالید)…………………………………….

    ۲-۱۱- دلایل انتخاب HPLC………………………………………………………………………..

    ۲-۱۱-۱- مشخصات دستگاه HPLC……………………………………………………………..

    ۲-۱۱-۲- انواع روش های HPLC آزمایش شده……………………………………………….

    ۲-۱۱-۳- روش تهیه بافر ۱۰X استات با ۴ pH=……………………………………………..

    ۲-۱۱-۴- روش تهیه بافر فسفات سدیم Mm 25 با ۵/۴ pH=…………………………….

    ۲-۱۲- استخراج متابولیت از ادرار انسان………………………………………………………….

    بخش سوم: نتایج

    ۳-۱- جداسازی سلولهای کبد………………………………………………………………………..

    ۳-۲- سنتز مکونین……………………………………………………………………………………..

    ۳-۳- روش کروماتوگرافی با کارکرد عالی (HPLC)……………………………………………

    بخش چهارم: بحث و نتیجه گیری

    ۴-۱- جداسازی سلول های کبد موش……………………………………………………………..

    ۴-۲- روش کروماتوگرافی با کارکرد عالی (HPLC)……………………………………………

    ۴-۳- متابولیسم نوسکاپین

    ۴-۴- متابولیسم نوسکاپین در ادرار انسان

    خلاصه انگلیسی

    منابع

    اختصارات

    اختصارات

    – ACEIS: Angiotensin Converting Enzyme Inhibitors

    – BSA: Bovine Serum Albomin

    -DMEM: Dulbecco’s Modified Eagle Medium

    – DMSO: Dimethyl sulfoxide

    EXP: Exposure

    EXT: Extract

    FBS: Fetal Bovine Serum

    FCS: Fetal Calf Serum

    HPLC: High Performance Liquid Chromatography

    MTT: 3- [4, 5- Dimethylthiazol- 2- yl]- 2,5- diphenyl tetrazolium bromide

    ml: milliLiter

    mM: millimole

    : ug: Microgram

    : Microlitre

    Rt = Retention time

    SPE= Solid Phase Extraction

    v = volume

    w = weight

    —————————————————–

    این فایل با فرمت ورد (doc) به تعداد ۸۲ صفحه  تایپ شده است  که  کاملا قابلیت ویرایش دارد و درون یک فایل فایل فشرده (zip) است که باید توسط برنامه هایی از قبیل winrar  آن را از حالت فشرده (extract) خارج سازید و توسط برنامه ی MICROSOFT  WORD فایل را باز کنید  که بهتر است از آفیس ورد ۲۰۱۰ استفاده کنید.

    اطلاعات فایل
    • موضوع : بررسی متابولیسم داروی نوسکاپین در سلولهای مجزای کبد موش
    • فرمت فایل : ورد doc
    • تعداد صفحه : 82
    • قیمت : 4900 تومان
    • حجم فایل : 1300 کیلوبایت

    درباره ی MrDoc.ir

    فروشگاه مسترداک دات آی آر شامل پایان نامه های آماده رایگان و غیر رایگان از رشته های فنی و مهندسی، علوم پایه و انسانی و پزشکی که کاملا تایپ شده و موضوعات متفرقه از تمام رشته های تحصیلی برای دانشجویان عزیز ارائه می دهد، که ارزش واقعی فایل ها بیشتر از قیمت آن است. آدرس شرکت: اصفهان - خیابان لاله شمالی - شرکت سامان گستر 03135673766

    پاسخ دهید

    نشانی ایمیل شما منتشر نخواهد شد. بخش‌های موردنیاز علامت‌گذاری شده‌اند *